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1、試驗(yàn)步驟

將一短軟管(6cm)或一鈍頭插管與一容量大于1mL的注射器連接,注射器和導(dǎo)管注滿后可使動(dòng)物能接受1mL試驗(yàn)樣品。應(yīng)為每只動(dòng)物分別準(zhǔn)備一套注射器和連接導(dǎo)管。

將動(dòng)物置于固定器中固定,以便于接觸會(huì)陰部位。或用固定器具將動(dòng)物束縛住后再固定其后肢,以暴露出會(huì)陰部位。

導(dǎo)管插入前可用對(duì)照樣品或適當(dāng)?shù)臐?rùn)滑劑濕潤(rùn)處理。

提起動(dòng)物尾巴暴露出會(huì)陰,然后將濕潤(rùn)處理過(guò)的導(dǎo)管輕柔地插入直腸,用注射器注入1mL試驗(yàn)液。抽出導(dǎo)管并以適當(dāng)?shù)姆椒ㄌ幹玫簟?/p>

由于動(dòng)物個(gè)體直腸容積的差異性,試驗(yàn)樣品注入時(shí)或注入后可能會(huì)有溢出,可用軟紙巾輕柔拭去溢出的液體。

每次間隔(24±2)h重復(fù)上述步驟,連續(xù)5d。

對(duì)于長(zhǎng)期重復(fù)接觸試驗(yàn),應(yīng)根據(jù)預(yù)期臨床接觸時(shí)間確定接觸次數(shù)、時(shí)間和間隔期。

2、動(dòng)物觀察

初次接觸后(24±2)h和每次試驗(yàn)操作前注意并記錄會(huì)陰部位溢液、紅斑和刺激狀況。

對(duì)于出現(xiàn)過(guò)度溢液、腫脹或難以給藥的動(dòng)物,應(yīng)無(wú)痛處死后做組織學(xué)檢查。

3、結(jié)果評(píng)價(jià)

肉眼觀察評(píng)價(jià)

末次接觸后(24±2)h無(wú)痛處死動(dòng)物,完整切下直腸后縱向剖開(kāi),檢查上皮組織層的刺激、損傷以及壞死情況。

將直腸和大腸的末端放入適當(dāng)?shù)墓潭▌┲泄潭ê筮M(jìn)行組織學(xué)檢查。

將試驗(yàn)兔的直腸組織與對(duì)照兔直腸組織進(jìn)行比較。

記錄并描述肉眼觀察下每只動(dòng)物直腸組織的狀況,注意試驗(yàn)與對(duì)照部位之間的差別。

注:這些觀察可能有助于組織學(xué)評(píng)價(jià)。

4、組織學(xué)評(píng)價(jià)

應(yīng)由病理學(xué)家對(duì)直腸組織的刺激作用進(jìn)行評(píng)價(jià)。

試驗(yàn)組全部動(dòng)物顯微鏡評(píng)價(jià)記分相加后再除以觀察總數(shù)即得出試驗(yàn)組平均記分。最大記分為16。

對(duì)照組同法計(jì)算。

對(duì)照組動(dòng)物出現(xiàn)顯微鏡評(píng)價(jià)總分大于9時(shí),表明試驗(yàn)操作中可能造成損傷。如其他試驗(yàn)或?qū)φ談?dòng)

物出現(xiàn)同樣的高分時(shí),可能有必要進(jìn)行復(fù)試。

試驗(yàn)組平均記分減去對(duì)照組平均記分即得出刺激指數(shù)。